熒光定量PCR(realtimefluorescencequantitativePCR，RTFQPCR)是1996年由美國AppliedBiosystems公司推出的一種新定量試驗技術，它是通過熒光染料或熒光標記的特異性的探針，對PCR產物進行標記跟蹤，實時在線監控反應過程，結合相應的軟件可以對產物進行分析，計算待測樣品模板的初始濃度。
　　
　　技術原理
　　
　　標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后，完成高溫變性、低溫復性、適溫延伸的熱循環，并遵守聚合酶鏈式反應規律，與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷，熒光素游離與反應體系中，在特定的激發光下發出熒光，隨著循環次數的增加，被擴增的目的基因片段呈指數規律增長，通過實時檢測與之相對應的隨擴增而變化的熒光信號強度，求得CT值，同時利用數個已知模板濃度的標準品作對照，即可得出待測標本目的基因的拷貝數。
　　
　　熒光定量PCR應用領域
　　
　　臨床疾病診斷：各型肝炎、艾滋病、禽流感、結核、性病等傳染病診斷和療效評價；地中海貧血、血友病、性別發育異常、智力低下綜合癥、胎兒畸形等優生優育檢測；腫瘤標志物及瘤基因檢測實現腫瘤病診斷；遺傳基因檢測實現遺傳病診斷。
　　
　　動物疾病檢測：禽流感、新城疫、口蹄疫、豬瘟、沙門菌、大腸埃希菌、胸膜肺炎放線桿菌、寄生蟲病等、炭疽芽孢桿菌。
　　
　　食品安全：食源微生物、食品過敏源、轉基因、乳品企業阪崎腸桿菌等檢測。
　　
　　科學研究：醫學、農牧、生物相關分子生物學定量研究。
　　
　　應用行業：各級各類醫療機構、大學及研究所、CDC、檢驗檢疫局、獸醫站、食品企業及乳品廠等。